Floresan mikroskobu, numuneyi aydınlatmak ve numunedeki florokromları uyarmak için yüksek yoğunluklu bir ışık kaynağı kullanan bir tür optik mikroskoptur. Numunenin aydınlatılması genellikle ultraviyole ışık yayan bir ışık kaynağı ile yapılır. Biyolojik, tıbbi ve endüstriyel alanlarda yaygın olarak kullanılırlar.
Floresan mikroskobu nasıl çalışır?
Bir floresan mikroskobu, ultraviyole ışık üretmek için bir cıva veya ksenon lambası kullanır. Işık mikroskoba gelir ve dikroik bir aynaya çarpar; bu ayna, bir dalga boyu aralığını yansıtan ve başka bir aralığın geçmesine izin veren bir aynadır. Dikroik ayna, ultraviyole ışığı numuneye kadar yansıtır. Bazı örnekler klorofil gibi floresan maddeler içerdikleri için ultraviyole ışık altında doğal olarak floresan ışık yayarlar. İncelenecek örnek doğal olarak floresan ışık yaymıyorsa, florokrom adı verilen floresan boyalarla boyanabilir.
Floresan mikroskobu nelerden oluşur?
1. Işık Kaynağı
En yaygın ışık kaynakları cıva, ksenon ve LED'lerdir. Cıva, floresan mikroskobu için en iyi ışık kalitesini sağlar. LED'ler diğer kaynaklara göre daha ucuz oldukları ve daha az güç tükettikleri için giderek daha popüler hale geliyor.
| Cıva Lambası | Ksenon Lamba | NEDEN OLMUŞ | |
| Yayılan Işığın Dalga Boyu | 350-370nm | 400nm~450nm | 400-700nm |
| Ömür boyu (saat) | 200-300 | 400-600 | 10000 |
| Avantaj | 1. Yüksek Yoğunluklu Işık, En Yaygın Işık Kaynakları. 2. Her türlü floroforu uyarmak için güçlü ultraviyole ve mavi-mor yayar. 3. Parlak ve renkli Görüntüler. | 1. Spektral yoğunluk stabildir. 2. Kızılötesi ve orta kızılötesinde güçlü spektral yoğunluk. | 1. Değiştirilmesi kolaydır. 2. Isınmaya gerek yok. 3. Anında açılıp kapatılabilir. 4. Işık kaynağı yoğunluğunu kontrol edin. |
| Dezavantaj | 1. Kısa Bir Ömür. 2. Uzun ısınma süresi. | 1. Aşırı ısı için özel düşük voltajlı DC güç kutusu gereklidir. 2. Cıva Lambasından Daha Pahalı | 1. UV ışığı cıvalı lambadan daha zayıftır. 2. Işığın her dalga boyu, yaydıkları dar bant genişlikleri nedeniyle ayrı bir LED gerektirir. |
Cıva Floresan Eklentisi
LED Floresan Eklentisi
2. Uyarma Filtresi
Uyarma filtresi, floresan mikroskobunun çalışması için gereklidir. Floresan boyanın absorbe edebileceği daha kısa dalga boyundaki ışığı geçirir. Ayrıca diğer heyecan verici ışık kaynaklarını da engeller.
Uyarma Filtresi(B,G,U,V)
3. Dikroik Ayna
Dikroik ayna, ışığı belirli dalga boylarında yansıtırken diğerlerini ileten bir tür optik filtredir. Floresan mikroskoplarda uyarma ve emisyon dalga boylarını ayırmak için kullanılır.
4. Emisyon Filtresi
Emisyon filtresi yalnızca florofor tarafından yayılan dalga boylarını geçirir ve bu bant dışındaki tüm istenmeyen ışığı, özellikle de uyarılma dalga boylarını engeller.
5. Floresan boyalar
Floresan boyalar, yüksek derecede aydınlatıcı ultraviyole ışık tarafından uyarıldıktan sonra yüksek kontrastlı görünür yeşil ışık yayarak floresan bir görüntü oluşturabilen, floresans özelliğine sahip organik bileşiklerdir. Yaygın olarak kullanılan floresan boyalar; DAPI (49,6-diamidino-2-fenilindol), akridin turuncusu, auramin-rodamin, Alexa Fluors veya DyLight 488.
Kaç çeşit floresans mikroskobu vardır?
1. Dik Epifloresans Mikroskobu:
Floresan mikroskobunun en yaygın türüdür. Floroforun uyarılması ve floresansın saptanması aynı ışık yolu aracılığıyla (yani objektif üzerinden) gerçekleştirilir. Floresan mikroskopların çoğunluğu, özellikle yaşam bilimlerinde kullanılanlar, epifloresan tasarımlıdır.
BS-2081F Araştırma Floresan Biyolojik Mikroskobu
2. Konfokal Floresan Mikroskobu:
Konfokal Floresan Mikroskop: Bu tür floresans mikroskobu, bir görüntü oluşturmak için lazer taramayı floresan aydınlatmayla birleştirir. Hücre ve dokuların incelenmesi, hücre içindeki proteinlerin ve diğer maddelerin tespit edilmesi ve malzemelerin kalınlığının ölçülmesi gibi çok çeşitli uygulamalarda kullanılabilir.
BS-2081F Araştırma Floresan Biyolojik Mikroskobu
3. Ters Floresan Mikroskop
Bu tür mikroskopların ışık kaynağı ve yoğunlaştırıcısı üstte, aşağıya bakacak şekilde bulunur. Aydınlatma açısı incelenen numunenin yüzeyine göre 90 derece olmalıdır.
BS-2095F Ters Floresan Mikroskop
Floresan mikroskopların avantajları ve dezavantajları nelerdir?
Avantajları:
- Canlı organizmalardaki hücrelerin zarar görmeden gözlemlenmesini sağlar
- Doğru renklerle yüksek çözünürlüklü görüntüler sağlar
- Hücrelerdeki canlı süreçlerin incelenmesine olanak sağlar
- Proteinler veya nükleik asitler gibi hücrelerin içindeki farklı molekül türlerini tanımlamak için kullanılır.
Dezavantajları:
-Sadece floresan boya ile etiketlenmiş bir hücrenin içindeki belirli yapıların gözlemlenmesine olanak sağlar.
-Flüoresans işlemi sırasında elektron uyarımından kaynaklanan ışıkla ağartma, flüoresan boyaların reaktif moleküllerini etkileyebilir. Sonuç olarak, reaktif boyalar floresans emisyon yoğunluğunun kimyasal özelliğini kaybedebilir.
-Flüorofor molekülleri kısa dalga boyundaki ışıktan yüksek enerjili fotonları emdiğinden, hücreler floresan boyalarla boyama sonrasında fototoksik etkiye karşı hassastır.
Floresan mikroskobunun uygulamaları nelerdir?
Floresan mikroskoplar biyokimya, hücre biyolojisi, mikrobiyoloji, immünoloji ve tıp dahil olmak üzere çeşitli araştırma ve uygulama alanlarında yaygın olarak kullanılmaktadır.
1. Biyoloji alanında, floresans mikroskobu, floresan boya etiketlemenin yardımıyla hücresel ve mikroskobik olmayan hücresel bileşenlerin ve aktivitelerin doğru ve ayrıntılı bir şekilde tanımlanmasını sağlar.
2. Tıp alanında, floresan mikroskobu, bakteri ve virüslerin varlığını ve dağılımını tespit etmek veya ameliyatı kolaylaştırmak için cerrahi hedeflerin etiketlenmesine yardımcı olmak için floresan reaktifleri kullanabilir.
3. Mineraloji alanında, floresan mikroskobu genellikle asfalt, petrol, kömür, grafen oksit ve diğer mineraller gibi kendiliğinden floresans özelliklerine sahip maddeleri incelemek için kullanılır.
4. Malzeme biliminde, floresan mikroskobu tekstil endüstrisinde veya kağıt endüstrisinde elyaf bazlı malzemeleri analiz etmek için kullanılabilir.
Gönderim zamanı: Mart-14-2023